Hace unas semanas, hemos realizado la práctica de extracción de ADN. A partir de esta experiencia, realizando determinados procedimientos conseguimos observar las fibras de cromatina de distintos alimentos, como el plátano, hígado...
PROCEDIMIENTO
1. Triturar la muestra (medio hígado de pollo, guisantes…) en un mortero. Añadir
arena para que al triturar se puedan romper las membranas de y queden los
núcleos sueltos. (Otra opción sería utilizar una batidora)
2. Añadir al triturado, 50 centímetros cúbicos de agua. Remover hasta hacer una
especie de papilla o puré.
3. Filtrar para separar los restos de tejidos que hayan quedado por romper.
4. Medir el volumen del filtrado con una probeta.
5. Añadir al filtrado un volumen igual de cloruro sódico 2M. Con esto conseguimos
producir el estallido de los núcleos para que queden libres las fibras de
cromatina.
6. A continuación se añade 1 centímetro cúbico de SDS o detergente. La acción de
este detergente es formar un complejo con las proteínas y separarlas del ADN.
Así nos quedará el ADN libre de las proteínas que tiene asociadas.
7. Añadir mediante una pipeta 50 centímetros cúbicos de alcohol. Hay que hacerlo
lentamente, de forma que el alcohol resbale por las paredes del vaso y se
formen dos capas. En la interfase, precipita el ADN.
8. Introducir una varilla de vidrio e ir removiendo siempre en la misma dirección.
En la figura se indican las capas. Sobre la varilla se van adhiriendo unas fibras
blancas, visibles a simple vista, que son el resultado de la agrupación de
muchas fibras de ADN.
Creemos que esta práctica ha sido muy interesante puesto que hemos aplicado nuestros conocimientos sobre Biología. La fotografía de la parte superior esta realizada con plátano y la inferior con hígado, en ellas se pueden observar las fibras de cromatina resultantes al aplicar los procedimientos indicados.
Paula Sánchez Urbina
Cecilia Arbesú Saracho
